国内首个双菌登记的产品对马铃薯晚疫病的防效研究

世界农化网中文网报道： 随着科学技术的不断发展和人们食品安全意识的提高，利用生防菌剂防治植物病害等绿色防控手段越来越受到业界的关注。然而，目前对马铃薯晚疫病有效的生防药剂还比较匮乏。已报道的生防菌剂主要有枯草芽孢杆菌、嗜线虫杆菌、木霉菌株HNA14及黑附球菌XFI等，可降低病害发生率。105亿CFU/g多粘菌·枯草菌可湿性粉剂是沈阳红旗林药有限公司新登记的混合菌剂(PD20200380)，具有广谱、高效等特点，但能否对马铃薯晚疫病菌具有抑制作用和对马铃薯晚疫病具有很好的防治效果，尚不清楚。

截至目前，多粘菌·枯草菌在国内有一项产品登记。

试验旨在通过开展室内抑菌试验和田间药效试验，筛选出防治效果好、对环境无污染及综合效益较好的马铃薯晚疫病生防菌剂，为薯农防治马铃薯晚疫病提供更多的药剂选择，进而为马铃薯绿色生产提供技术支撑和科学依据。

一、材料与方法

1. 室内抑菌试验

（1）供试菌株及药剂

供试菌株：马铃薯晚疫病菌(Phyophthora infestans)．由沈阳农业大学马铃薯病害研究室提供，保存备用。

供试培养基：燕麦琼脂培养基(燕麦片20g，琼脂16~18g，蒸馏水1000mL)。

供试生防药剂：105亿CFU/g多粘菌·枯草菌WP，沈阳红旗林药有限公司；10亿CFU/g多粘类芽孢杆菌WP，市售；100亿CFU/g胶冻样芽孢杆菌WP．市售；10亿CFU/g海洋芽孢杆菌WP，市售。

（2）试验方法

采用平板对峙培养法。将保存的马铃薯晚疫病菌接种于燕麦琼脂培养基(OMA)平板培养活化，待长出菌落后，用直径为5mm的打孔器在菌落边缘取菌饼。通过十字交叉法在配制好的OMA培养皿底部找到中心，然后在其上划十字线，将直径为5mm的病原菌菌饼接种到中心。将生防菌菌饼接种到距离中心22.5mm的2侧。以不接生防菌的OMA平板为对照，在对照组的病原菌长满整个培养基平板时，观察供试菌剂对晚疫病菌的抑菌效果。每个处理3个重复。

2. 田间防效试验

（1）试验地概况

试验地1位于四川省凉山彝族自治州昭觉县瓦古村，试验地2位于盐源县白乌镇长坪子村，均选择上一年马铃薯晚疫病发病严重地块。土壤类型为红壤土，土壤肥力中等，pH值5.5~6.5。田间管理按常规管理进行。

（2）供试马铃薯品种和药剂

马铃薯品种为当地种植品种青薯9号。

试验选用的生物菌剂为105亿CFU/g多粘菌·枯草菌可湿性粉剂，化学药剂80%波尔多液、80%代森锰锌、687.5g/L氟菌·霜霉威、68%精甲霜·锰锌为对照药剂，剂型和用量等信息如下，清水为空白对照。

A.105亿CFU/g多粘菌·枯草菌可湿性粉剂，制剂用药量100g/667m2; B.80%波尔多液可湿性粉剂，制剂用药量60g/667m2; C.80%代森锰锌可湿性粉剂，制剂用药量100g/667m2; D.687.5g/L氟菌·霜霉威悬浮剂，制剂用药量100g/667m2; E.68%精甲霜·锰锌水分散粒剂，制剂用药量100g/667m2：

（3）试验方法

试验设6个处理，4次重复，共24个小区，每小区面积80m2，每小区约540株马铃薯，小区完全随机排列。

在马铃薯晚疫病出现中心病株时进行叶面喷雾同时喷淋植株茎基部，共施药2次。试验地点l第1次施药时间为2021年5月18日，第2次施药时间为2021年6月1日；试验地点2第1次施药时间为2021年6月5日，第2次施药时间为2021年6月19日。

（4）病害调查方法

调查时间：共调查2次。试验地点1在第2次施药前（6月1日）和药后14d(6月15日)分别进行调查记载并计算发病率和病情指数；试验地点2在第2次施药前（6月19日）和药后14d(7月3日)进行调查。

病情分级标准(参照GB/T 17980.34-2000)【10】：0级：无病斑；1级：病斑面积占整个叶面积5%以下；3级：病斑面积占整个叶面积6%-10%；5级：病斑面积占整个叶面积11%-20%；7级：病斑面积占整个叶面积21%-50%；9级：病斑面积占整个叶面积50%以上。

式中：CK1为空白对照区施药后病情指数；PT1为药剂处理区施药后病情指数。

二、结果与分析

1. 室内抑菌试验

平板对峙培养6d后，4种供试生防菌与马铃薯晚疫病菌之间均形成了抑菌带，根据抑菌面积比较：105亿CFU/g多粘菌·枯草菌可湿性粉剂>100亿CFU/g胶冻样芽孢杆菌可湿性粉剂>10亿CFU/g海洋芽孢杆菌可湿性粉剂>10亿CFU/g多粘类芽孢杆菌可湿性粉剂。

其中生防菌105亿CFU/g多粘菌·枯草菌可湿性粉剂产生抑菌圈更加明显，可以进一步应用于田间试验。

2. 105亿CFU/g多粘菌·枯草菌WP田间防治效果

（1）瓦古村田间防治效果

田间调查马铃薯晚疫病零星发病的时间为2021年5月15日，试验于2021年5月18日开始施用第1次药，第1次调查时间为2021年6月1日，也是第2次施药时间，第2次调查时间为2021年6月15日。

第1次施药14d后，5种药剂对马铃薯晚疫病均有防效，其中687.5 g/L氟菌·霜霉威悬浮剂处理的平均防效为85.14%，防效最高，其次为105亿CFU/g;多粘菌·枯草菌可湿性粉剂处理的平均防效为77.52%，68%精甲霜·锰锌水分散粒剂处理的平均防效为72.57%，80%代森锰锌可湿性粉剂处理的平均防效为71.38%，80%波尔多液可湿性粉剂处理的平均防效为68.81%，5个处理与对照间均有显著差异。

第2次施药14d后，105亿CFU/g多粘菌·枯草菌可湿性粉剂处理的平均防效最高为80.35%，687.5g/L氟菌·霜霉威悬浮剂处理次之为79.84%，68%精甲霜·锰锌水分散粒剂处理的平均防效为73.27%，80%代森锰锌可湿性粉剂处理的平均防效为73.00%，80%波尔多液可湿性粉剂处理的平均防效为70.55%，5个处理与对照间均有显著差异，105亿CFU/g多粘菌·枯草菌可湿性粉剂防治效果最好。

（2）长坪子村田间防治效果

田间发现马铃薯晚疫病初发病时间为2021年6月2日，本试验于2021年6月5日开始第1次喷药，第1次调查时间为2021年6月19日，即第2次施药前，第2次调查时间为2021年7月3日，防治效果见表2。

第1次施药14d后，5种药剂对马铃薯晚疫病均有防效，其中687.5g/L氟菌·霜霉威悬浮剂处理的平均防效为84.28%，防效最高，其次为105亿CFU/g多粘菌·枯草菌可湿性粉剂处理的平均防效为78.86%，68%精甲霜·锰锌水分散粒剂处理的平均防效为73.90%，80%代森锰锌可湿性粉剂处理的平均防效为72.61%，80%波尔多液可湿性粉剂处理的平均防效为69.49%，5个处理与对照间均有显著差异。

第2次施药14d后，105亿CFU/g多粘菌·枯草菌可湿性粉剂处理的平均防效最高为81.03%，687.5g/L氟菌·霜霉威悬浮剂处理次之为80.01%，68%精甲霜·锰锌水分散粒剂处理的平均防效为73.61%，80%代森锰锌可湿性粉剂处理的平均防效为73.42%，80%波尔多液可湿性粉剂处理的平均防效为70.96%，5个处理与对照间均有显著差异，105亿CFU/g多粘菌·枯草菌可湿性粉剂防治效果最好。

综合2个地点的调查结果，各处理对马铃薯晚疫病均有较好的防控效果，105亿CFU/g多粘菌·枯草菌可湿性粉剂在2个试验地2次处理14d后的防治效果更加显著，防效可达80%以上，优于化学农药687.5g/L氟菌·霜霉威悬浮剂。

三、讨论与结论

室内抑菌试验和田间防效试验均表明，105亿CFU/g多粘菌·枯草菌可湿性粉剂对马铃薯晚疫病具有很好的防治效果，2个试验地在亩用量100g并施用2次14d后的防效均达到80%以上，优于对照的化学药剂，充分表明了该产品对防治马铃薯晚疫病具有很好的应用前景，适合在四川省凉山州应用，且对环境影响小，病菌不会产生抗药性。

105亿CFU/g多粘菌·枯草菌WP是由5亿CUF多粘类芽孢杆菌和100亿CUF枯草芽孢杆菌合理混配而成，是国内首个双菌登记的产品。这2种芽孢杆菌各有很广的抑菌谱，对细菌和真菌都有良好抑制作用，混配后对细菌和真菌引起的病害也都有很好的预防和治疗作用。该产品已登记在烟草作物防治赤星病（Alternaria  alternata)，本试验表明，105亿CFU/g多粘菌．枯草菌WP对卵菌引起的植物病害也有很好的防治效果，因此其新作用机制和应用前景尚需进一步深入研究开发。

作者：施乾芮  刘倩雯  陈友华等