云南大学杀线虫芽孢杆菌B16作用机制及应用

世界农化网中文网报道： 

中文通用名称：杀线虫芽孢杆菌B16粉剂

英文通用名称：Bacillus nematocida B16

产品有效成分：杀线虫芽孢杆菌，隶属于细菌界、厚壁菌门、芽孢杆菌纲、芽孢杆菌科、芽孢杆菌属、杀线虫芽孢杆菌（Bacillus nematocida）、B16菌株。能在4～50℃范围内生长，最适生长温度为20～37℃，生长pH值范围6.0～8.5，最适生长pH值7.0～8.0。B. nematocida B16为革兰氏阳性菌，好氧，细胞杆状，长2.0～3.5μm，宽0.8～1.2 μm。在LB培养基上37℃培养3 d，菌落圆形，直径1.0～2.0 mm，表面粗糙无光泽，类似细小粉末状，菌苔白色；胞内可见少数内生孢子或释放到胞外的芽孢，5 d后菌体几乎全生成芽孢。该菌显著的甲基萘醌是MK-7。主要的细胞脂肪酸成分为anteiso-C15:0（48.67%），iso-C15:0（13.45%），C16:0（9.06%）和anteiso-C17:0（8.29%）。用通用引物27F和1541RPCR扩增该菌株基因组，其16SrDNA序列在GenBank中的序列号为AY820954。

理化性质：外观为深黄色固体粉末，松密度0.324 g/mL，实密度0.447 g/mL，不溶于水，接触强酸、强碱5 h以上可以使菌体失活，对包装材料不具有腐蚀性。

毒性评价：5亿CFU/g杀线虫芽孢杆菌粉剂的急性经口毒性为雌性大鼠＞5,000 mg/kg，微毒；急性经皮毒性为雌雄大鼠＞5,000 mg/kg，微毒，对兔眼无刺激性，对兔皮肤无刺激性。对豚鼠的致命性为未见皮肤变态反应；急性吸入为雌雄大鼠＞（5,053±167）mg/m3，微毒。

健康危害：对皮肤无刺激作用；无致畸性、无致癌性、无致突性。

环境危害：为微毒的微生物农药，对环境无危害；对鹌鹑的LD50＞5×108单位/kg体重；对斑马鱼的LD50（30 d）＞1×1016单位/mL；对大型溞的ED50（21 d）＞1×106单位/mL。

燃爆危害：遇明火不可燃。

作用机制及应用：杀线虫芽孢杆菌B16粉剂主要用于防治多种作物的寄生线虫病。其作用原理是B. nematocida B16菌株可以产生7种诱吸线虫的信号物质（苯甲醛、苯甲酸苄酯、苯乙酮、2-庚酮、吲哚、萘和2,5-二甲基茴香醚）吸引线虫靠近菌体细胞，进而分泌胞外丝氨酸蛋白酶（Bace16）和中性蛋白酶（Bae16）杀死线虫；这两种毒性蛋白酶对线虫肠道的作用是导致线虫的死亡主要原因；B16菌株中的QS系统参与毒性蛋白酶基因的表达调控，并与吸引线虫的化学物质的合成代谢途径密切相关。经室内活性试验和田间药效试验，结果表明5亿CFU/g杀线虫芽孢杆菌粉剂在试验剂量为2,500、5,000、10,000g/667 m2时，对供试番茄植株安全。1年8地田间药效试验结果显示，作物移栽时穴施1次，药后30 d的防效为55.22%～64.47%，药后45 d的防效为61.86%～77.34%，药后60 d的防效为57.6%～75.52%，药后116 d的防效为56.99%～74.19%，药后142 d的防效为61.34%～82.92%，防效与对照药剂（10%噻唑膦颗粒剂）相当。2020年在山东、四川两地大田示范显示，药后30 d的防效为83.46%～89.09%，药后60 d的防效为79.07%～86.78%，药后80 d的防效为78.1%～85.2%；推荐用量2,000～2,500 g/667 m2。在用药剂量范围内对作物安全，未见药害发生。对捕食天敌、寄生天敌无影响。

产品登记情况：PD20211362  杀线虫芽孢杆菌B16粉剂（5亿CFU/g）

登记证持有人：云南大学。