世界农化网中文网报道:近日,中国农业大学植物保护学院沈杰、闫硕教授团队在国际学术期刊Journal of Nanobiotechnology在线发表研究论文Barrier to bypass: a PEI-functionalized star polycation platform for potent broad-spectrum aphid RNAi management。该研究通过对星形阳离子聚合物SPc进行聚乙烯亚胺(PEI)功能化,构建了一种可跨越多重生物屏障的dsRNA纳米递送平台,并在此基础上开发出对多种蚜虫具有广谱防控效果的RNA农药,系统解析了PEI功能化增强RNA细胞内化的分子机制,为RNA农药的高效递送提供了新思路。
蚜虫是农业生产中的重要害虫,可危害多种作物并传播病毒,严重制约作物产量和品质。RNAi技术为害虫绿色防控提供了新策略,但外源dsRNA在田间易被核酸酶降解,且难以穿越叶片表面、昆虫表皮和细胞膜等多道生物屏障,稳定递送与高效内化是限制RNA农药应用的核心瓶颈。围绕这一难题,团队在SPc递送载体的基础上引入聚乙烯亚胺(PEI)进行功能化改造,力求让RNA农药"送得稳、进得去、杀得准"(图 1)。

图1 SPcP3纳米载体构建、递送及蚜虫防控示意图
团队研究结果表明,SPcP3与dsRNA通过静电作用、氢键和范德华力组装形成紧凑的球形纳米复合物,显著提高了dsRNA在核酸酶、高温和极端pH条件下的稳定性。在稳定递送的基础上,SPcP3进一步改善了dsRNA在叶片表面的沉积、蚜虫表皮的渗透和细胞内的摄取,其细胞摄取效率较裸dsRNA提高26.5倍,并增强了靶基因沉默效率,从而提升了RNAi介导的杀虫活性(图2和图3)。

图2 SPcP3提升dsRNA的叶面润湿性、持留量与植物吸收

图3 SPcP3增强dsRNA在蚜虫表皮的渗透和细胞内递送
转录组分析进一步揭示了SPcP3增强递送的分子机制。研究结果表明,SPcP3介导的递送增强来源于对内吞作用、囊泡转运、溶酶体相关过程及跨膜转运的协同激活,与PEI的"质子海绵"效应相一致(图 4)。

图4 SPcP3增强细胞摄取的转录组分析
基于上述机制,该研究进一步开发了多靶点RNA农药。团队筛选出5种重要蚜虫中ATP合成酶(ATP-d)、几丁质合成酶(CHS)和蜕皮激素受体(EcR)三个基因的保守序列,组装成多靶点shRNA配方(shRNAs/SPcP3)。室内喷施实验表明,该配方对5种蚜虫表现出良好的广谱防控效果,防效达87.3%–96.9%,且对黄瓜生长、天敌异色瓢虫及Sf9细胞均无明显不良影响,显示出较好的应用潜力(图 5)。

图5 多靶标shRNAs/SPcP3对五种蚜虫的广谱防控效果
本研究揭示了PEI功能化纳米载体突破RNA农药多重递送屏障的内在机制,构建了可规模化、环境友好的广谱蚜虫RNA农药递送平台,为RNA农药的科学设计和农业害虫绿色防控提供了重要参考。
论文链接:https://link.springer.com/article/10.1186/s12951-026-05180-w
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