杀菌剂抗性风险评估资料要求与常见问题提示

日期:06-14-2022

世界农化网中文网报道： 抗性风险评估是农药登记风险评估体系中的一环，也是农药登记药效资料的重要组成部分。近年来，农业重大病虫害抗药性发生发展形势严峻，解决抗药性问题迫在眉睫，在此背景下，农药登记阶段开展抗性风险评估就显得更为重要，登记初期全面了解产品特点和抗性风险有利于指导登记后的合理使用，延缓抗性发展，推动抗性治理到预防和延缓抗性产生的发展。以往有不少案例存在风险不可接受导致登记无法获批的情况，需要引起大家重视。

表1  杀菌剂抗性风险评估靶标病原菌清单

       其次，哪些情况可以减免抗性风险评估资料？

       （1）不涉及新对象

       参照的已登记产品包括不在登记有效状态的产品。已有其他规定或禁限用农药除外。

       （2）与其他非特色小宗作物上登记的靶标相同

       杀菌剂：单一侵染；混合侵染。

       （3）哪些靶标不能开展田间种群交互抗性试验？

       不能进行室内活性和毒力测定的；不同年份田间种群发生不稳定，不能获得满足试验需要的种群数量。

       （4）用于特色小宗作物的农药（参照用药短缺特色小宗作物名录2019版）

       （5）生物化学农药，微生物农药，植物源农药

       （6）植物生长调节剂

       再次，关于抗性风险评估资料的要求可分为三类：完整提交、部分减免和全部减免。需要提交完整抗性风险评估资料的情况有：列入《靶标病原菌清单》的病原菌，抗性风险较高的、新发生病害的病原菌。注意靶标病原菌抗药性的潜在风险分析，一般应包括抗药性突变体筛选、抗性突变频率、抗性指数、抗性菌株适合度等。可部分减免的情况：列入清单中的作物和病原菌，如因病原菌的培养特性和寄生特点，在现有条件下难以获得突变体，可申请减免抗药性潜在风险分析和交互抗性资料，说明减免理由；但需进行敏感基线的建立、抗性风险理论分析，并对中、高等抗性风险水平的提出抗性风险管理措施。如苹果白粉病菌、辣椒白粉病菌、花生叶斑病菌、水稻稻曲病菌、玉米灰斑病菌等。可全部减免的情况有5中情形：① 未列入清单的低风险种传、土传靶标菌或者室内难以培养的病原菌等；② 传统的多作用位点杀菌剂、杀线虫剂、抗病毒药剂、抑制病原菌黑色素生物合成的杀菌剂等；③ 防治细菌病害的非抗生素类杀菌剂；④ 危害特征一致的同种致病菌，在非特色小宗作物上已登记或已进行过抗性风险评估的；⑤ 其他可以减免的情形。

       最后，涉及到抗性风险评估的常见问题有：试验依据方面，比如目前制定的相关准则和标准涵盖面有限，方法不统一；没有严格按照准则执行，如样本量不足等。试验结论方面，对于中、高抗性风险的情况，没有提出有效的抗性风险管理措施，如限制用药次数等。资料减免方面，未提交减免说明或提交的说明不合理；不确定是否可以减免，没列入清单的靶标或药剂不代表可以减免抗性风险评估。

       还有需要补充的是可以减免抗性风险评估资料的情形中，存在几种难以界定的情况：

       A. 是否涉及新防治对象的判定——参照相同有效成分的登记情况，包括曾经登记过但目前无效的产品的防治对象，已有其他规定或禁限用农药除外。

       B. 杀菌剂全部减免情形④强调是同种致病菌，不是同种病害名称，如草莓白粉病和葡萄白粉病是不同致病菌，不能作为减免的依据。

       尤其是杀菌剂抗性风险评估试验应注意的问题：

       （1）敏感基线：田间菌株采集范围不少于5个省，局部发生的病害应涵盖2～3个省；用于建立敏感基线的敏感菌株数量至少60～100株；测定方法合理，应反映药剂及病原菌特性；用于确定敏感基线的EC₅₀分布曲线，应满足单峰曲线的要求，EC₅₀值之间的差异一般在10～100倍之间。

       （2）抗性突变体筛选：亲本菌株数量至少10株，以EC₅₀值较高的为主；室内抗性驯化筛选至少20代；20代后未获得抗性突变体的，可分别测定对敏感菌株筛选20代后，后代中5株以上菌株的毒力，比较敏感性变化，分析交互抗性可能发生的趋势。原则上抗性风险级别均为3的药剂-病原菌组合应获得抗性突变体。

       （3）交互抗性：分析拟登记药剂与生产上实际使用的主要药剂（各主要类别选1种常用药剂）之间的交互抗性。选取抗药性突变体及其亲本菌株和其他敏感菌株来进行交互抗药性的研究。其中，其他敏感菌株选择来自于不同地区不同敏感性的菌株（5株以上）；抗性菌株尽量选择涵盖不同抗性水平抗性群体5株以上，总供试菌株数量在10株以上。计算方法：采用线性回归方法，重点关注r值或R₂值，采用Spearman秩相关，重点关注置性水平P和相关系数ρ。